基于FACS的单B细胞筛选平台加速抗体发现

自1986年单克隆抗体Orthoclone OKT3（muromonab-CD3）获批以来，尤其自1994年重组抗体Abciximab（Reopro®）问世后，单克隆抗体（mAbs）已成为现代治疗的重要支柱。截至2024年，FDA共批准159种抗体类生物制剂，其中治疗性单抗超过100种，涵盖抗体药物偶联物、双特异性抗体及Fc融合蛋白等多种形式[1]。

一、单B细胞筛选的崛起

抗体发现主要依赖多种经典筛选技术，包括单B细胞筛选、杂交瘤、噬菌体展示及转基因小鼠等方法。在全球抗体发现市场中，单B细胞筛选技术于2024年约占10%的市场份额[2]，预计在2025至2033年间将以约14.7%的复合年均增长率（CAGR）持续增长[3]。其中，单B细胞筛选近年来发展迅速，表现尤为突出。一项研究表明，经抗原特异性富集的单B细胞中，功能性抗体比例可达72%，显著高于噬菌体展示法的39%[4]。该技术能够直接从免疫动物或人源供体中分离抗原特异性B细胞，并保留天然的重链（VH）与轻链（VL）配对，从而有效提升抗体的功能完整性与亲和力。

图1 2024年抗体发现市场各技术占比[2]

二、单B细胞筛选的核心技术

在单B细胞抗体发现领域，荧光激活细胞分选（FACS）依然是核心技术，因其在速度、精确度和多参数分析方面具有无可比拟的优势。通过多色荧光标记抗原和细胞表面标记物，FACS能够以每秒高达一万细胞的速度快速分离单个抗原特异性B细胞，非常适合大规模、高通量筛选。其在高特异性捕获稀有细胞群体方面的能力，加上成熟的实验方案和广泛的可用性，使其在不同研究环境中可靠且适应性强。虽然基于微流控的系统（包括微滴和微孔平台）在进行分泌抗体功能分析方面表现出色，但通常伴随更高的器件复杂度、成本及下游回收效率挑战。相比之下，FACS流程简洁、体系成熟，尤其适用于记忆B细胞的抗原特异性筛选，可直接获取用于基因扩增的单细胞样本[5]。

图2 基于FACS的单B细胞抗体筛选流程图

三、单B细胞筛选流程

单B细胞筛选流程始于对模型动物（如：兔子）进行抗原免疫，以激发抗原特异性B细胞反应。随后分离外周血单个核细胞（PBMCs），并通过FACS精确筛选抗原特异性B细胞。随后对这些B细胞的VH和VL基因进行RT-PCR扩增，并克隆入表达载体进行瞬时抗体表达。表达的抗体经测序以确认其序列及多样性，然后在哺乳动物细胞系（如HEK293或CHO细胞）中进行大规模表达。最后，通过ELISA、表面等离子共振（SPR）或细胞实验等方法对抗体进行功能验证，包括结合力、特异性及活性，从而实现高亲和力、抗原特异性的单克隆抗体快速发现与开发。

服务优势

更快：仅需8–10周，比传统杂交瘤法缩短约50%。

更准：天然VH/VL配对，保证抗体的结构和功能真实性。

更强：筛选得到的抗体亲和力高达10^-⁸–10^-¹² M。

更稳：鼠源与兔源系统兼容，满足药企、诊断公司及科研客户多样需求。

服务详情

擎科加速您的抗体发现之旅

擎科抗体一站式服务，为您提供从免疫原到抗体开发的全流程解决方案。

擎科生物单B细胞抗体筛选平台，已准备就绪，助您快速解锁高亲和力抗体的巨大潜力。

立即联系我们：protein@tsingke.com.cn，了解如何利用我们的平台优势，显著缩短您的候选分子发现周期。

[1] A correction has been published: Antibody Therapeutics, Volume 8, Issue 3, July 2025, Page 238 

[2] Antibody Discovery Market Future Shaped by AI and Partnerships

[3] Single B Cell Antibody Discovery Market

[4] Mahendra, A., Haque, A., Prabakaran, P. et al. Honing-in antigen-specific cells during antibody discovery: a user-friendly process to mine a deeper repertoire. Commun Biol 5, 1157 (2022).  

[5] 10.1186/s13036-025-00513-z