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张楠
北京 大兴区
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1011 人阅读发布时间:2021-09-29 12:39
背景介绍
N6-甲基腺嘌呤(m6A)是真核生物最常见和最丰富的RNA分子修饰。m6A修饰是METTL3等甲基转移酶复合体催化的,而最近新发现的RNA去甲基化酶FTO和ALKBH5可以通过一种α-酮戊二酸和Fe2+依赖型的形式对m6A去甲基化。METTL3、FTO和ALKBH5被证明在很多生物过程中起重要作用,从发育和代谢到生殖。m6A存在于很多物种中,占到了RNA碱基甲基化修饰的80%。m6A主要分布在mRNA中,也出现在非编码RNA如tRNA、rRNA和snRNA。在转录成的RNA中相对高的m6A含量会影响RNA的代谢过程,比如剪切,核转运,翻译能力和稳定性,以及RNA转录。

图1.RNA甲基化修饰示意图
主要相关产品及服务
1、预制病毒
擎科生物可提供用于m6A甲基化功能相关基因过表达和干扰慢病毒,可用于研究目标基因m6A甲基化功能以及m6A通路基因过表达或干扰稳转细胞株,方便下游实验。

2、m6A修饰片段合成
像合成引物一样合成m6A修饰的RNA,最长可合成至80碱基。


单碱基延长连接技术可检测m6A单碱基甲基化情况,具有灵敏度高,操作简单的特点。可用于特定位点 m6A修饰定量,m6A甲基化丰富差异分析和目标位点m6A修饰鉴定。
技术应用
验证样本间特定位点m6A修饰丰度差异;
检测RNA目标位点是否存在m6A修饰;
对特定位点的m6A修饰丰度进行绝对定量;
鉴定m6A修饰相关蛋白的作用靶点。
荧光定量PCR进行精确定量,达到单碱基分辨率;
无需抗体IP,无需同位素标记,降低成本,可操作性高;
灵敏度高,总RNA所需样本低至1μg。
总RNA,≥1μg/样本;
细胞,≥2.5×105个细胞/样本。

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